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薄层色谱扫描仪的操作方法及注意事项讲解

更新时间:2022-10-20  |  点击率:225
  今天小编给大家讲讲薄层色谱扫描仪的操作方法及注意事项:
 
  操作方法:
 
  1、薄层板制备:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器行涂布(厚度为0.2—0.3mm),取下涂好薄层的玻璃板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟。即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。
 
  2、点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,般为圆点,点样基线距底边2.0cm,点样直径为2——4mm,点间距离约为1.5—2.0cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时须注意勿损伤薄层表面。
 
  3、展开:展开室如需预用展开剂饱和,可在室中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与室样、宽的滤纸条,端浸入展开剂中,密封室的盖,使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5—1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,等展开至规定距离(般为10—15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。
 
  如需用薄层色谱扫描仪对色谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法。薄层扫描的方法,除另有规定外,可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明,结合具体情况,选择吸收法或荧光法,用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多,故应在保证供试品的斑点在定浓度范围内呈线性的情况下,将供试品与对照品在同块薄层上展开后扫描,行并计算定量,以减少误差。各种供试品,只有得到分离度和重现性好的薄层色谱,才能获得满意的结果。
 
  注意事项:
 
  1、所用玻璃板应洗净不挂水珠,光滑平整。
 
  2、铺板要均匀,厚度适宜,并于室温下晾干后在110℃活化30分钟,置于 有干燥剂的干燥箱或干燥器中备用。
 
  3、点样点般为圆点,不能太大。